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Immunologia

Attrezzature e metodi



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Metodiche

  • Produzione e caratterizzazione di anticorpi monoclonali diretti contro strutture di superficie di cellule NK, linfociti T citotossici e di cellule tumorali.
  • Tecniche di clonazione di linfociti T e NK e analisi funzionali: valutazione dell'attività citotossica e della produzione di citochine.
  • Identificazione di linfociti T antigene-specifici mediante tetrametri.
  • Coltura di cellule stromali isolate da linfonodi, midollo osseo, biopsie cutanee e d'organo e colture di cellule tumorali provenienti da tumori solidi.
  • Valutazione apoptosi mediante annessina V, ioduro di propidio, DNA laddering.
  • Saggi di migrazione transendoteliale.
  • Valutazione molecole solubili mediante ELISA.
  • Tecniche avanzate di citofluorimetria.
  • Tecniche di microscopia confocale.
  • Estrazione di proteine da tessuti umani normali e neoplastici o da colture cellulari, e loro separazione utilizzando varie tecniche cromatografiche.
  • Expertise nell’ambito della tecnologia della proteomica: 1D e 2D SDS-PAGE-immunoblotting, preparazione dei campioni per l’analisi mediante spettrometria di massa.
  • Spettrometria di massa (in collaborazione con l’Istituto G. Gaslini di Genova) per identificazione degli antigeni tumore associati.
  • Produzione e caratterizzazione di anticorpi ricombinanti umani (phage display library technology). Il laboratorio ha in uso (in collaborazione con l'Università degli Studi di Genova) Phage Display Libraries per la selezione di anticorpi ricombinanti umani che, opportunamente ingegnerizzati, costituiscono ottimi reagenti sia per diagnostica che per terapia.
  • Tecniche di clonaggio in vettori per espressione di proteine in batteri e cellule di mammifero.
  • Studio di tumor-targeting in vivo utilizzando molecole radiomarcate in collaborazione con l'Animal Facility dell’IST.
  • Antibody array.

Attrezzature

  • Laboratori attrezzati per colture cellulari
  • Microscopio per analisi immagine IX70 corredato da CellR e sistema di deconvoluzione per la valutazione in singola cellula della concentrazione endocellulare di ioni calcio, magnesio, H+
  • Microscopio confocale FV 500
  • Microscopio Axiovert 100 corredato di sistema Attofluor per analisi in singola cellula della concentrazione di ioni calcio, magnesio, H+
  • Spettrofluorimetro LS50B per la valutazione della concentrazione di ioni intracellulari
  • Fluorescence Activated Cell Sorter (FACSort) per la separazione di sottopopolazioni cellulari
  • FACSan per l'analisi citofluorimetrica della espressione di antigeni
  • Apparecchiatura per 1D e 2D-gel-elettroforesi
  • Camera calda per uso isotopi radioattivi (beta e gamma emittenti)
  • Cappe biohazard, cappe chimiche
  • Incubatori CO2
  • Congelatori -80°C e contenitori azoto liquido


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