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Metodiche
- Produzione di anticorpi monoclonali murini.
- Selezione di anticorpi ricombinanti da librerie fagiche.
- Tecniche di base di biologia molecolare (preparazione di plasmidi, Real Time PCR,
Southern e northern blot, produzione di proteine
ricombinanti in eucarioti o procarioti e loro purificazione mediante
cromatografia di affinitą, test di funzionalitą di promotori mediante
CAT-ELISA o luciferasi).
- Generazione di costrutti chimerici scFv/citochina.
- Mutagenesi sito specifica.
- Assemblaggio e produzione di vettori plasmidici di espressione per
trasfezione o vaccini a DNA.
- Studio di fattori trascrizionali mediante EMSA o affinitą su DNA
immobilizzato.
- Tecniche biochimiche convenzionali (western blot, immunoprecipitazione,
immunoprecipitazione preparativa per spettrometria di massa, purificazione
mediante cromatografia etc.) e elettroforesi bidimensionale.
- Microscopia a fluorescenza e confocale.
- Analisi citofluorimetrica di marcatori di membrana e apoptosi.
- Tecniche di base in colture cellulari (linee continue e colture
primarie).
- Separazione immunomagnetica di cellule e di acidi nucleici.
- Tecniche immunologiche di base (clonaggio di linfociti T, test di
funzionalitą linfocitaria: proliferazione, produzione di citochine
mediante test biologici, ELISA o elispot, test CTL).
- Test di tumorigenicitą e modelli preclinici di tumori trapiantabili
nell'animale.
- Vaccinazione a DNA mediante elettropermeabilizzazione in vivo.
- Test tossicologici in vivo.
- Test di farmacocinetica preclinica.
- Dosaggio farmaci antitumorali Pt-derivati.
Attrezzature
- Attrezzatura standard per colture cellulari, biologia molecolare e colture batteriche
- Strumento per PCR quantitativa a 4 colori
- Citofluorimetro FACScan
- Spettrofluorimetro accessoriato per analisi di flussi Ca++ in cellule
- Spettrofotometro
- Lettore ELISA multiscan
- Gamma-counter
- Elettroporatore standard e a onda quadra per elettroporazione in vivo
- Microscopio ottico e a fluorescenza
- Super e ultracentrifuga
- Spettrometria di assorbimento atomico
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