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Terapia immunologica

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Metodiche

  • Produzione di anticorpi monoclonali murini.
  • Selezione di anticorpi ricombinanti da librerie fagiche.
  • Tecniche di base di biologia molecolare (preparazione di plasmidi, Real Time PCR, Southern e northern blot, produzione di proteine ricombinanti in eucarioti o procarioti e loro purificazione mediante cromatografia di affinitą, test di funzionalitą di promotori mediante CAT-ELISA o luciferasi).
  • Generazione di costrutti chimerici scFv/citochina.
  • Mutagenesi sito specifica.
  • Assemblaggio e produzione di vettori plasmidici di espressione per trasfezione o vaccini a DNA.
  • Studio di fattori trascrizionali mediante EMSA o affinitą su DNA immobilizzato.
  • Tecniche biochimiche convenzionali (western blot, immunoprecipitazione, immunoprecipitazione preparativa per spettrometria di massa, purificazione mediante cromatografia etc.) e elettroforesi bidimensionale.
  • Microscopia a fluorescenza e confocale.
  • Analisi citofluorimetrica di marcatori di membrana e apoptosi.
  • Tecniche di base in colture cellulari (linee continue e colture primarie).
  • Separazione immunomagnetica di cellule e di acidi nucleici.
  • Tecniche immunologiche di base (clonaggio di linfociti T, test di funzionalitą linfocitaria: proliferazione, produzione di citochine mediante test biologici, ELISA o elispot, test CTL).
  • Test di tumorigenicitą e modelli preclinici di tumori trapiantabili nell'animale.
  • Vaccinazione a DNA mediante elettropermeabilizzazione in vivo.
  • Test tossicologici in vivo.
  • Test di farmacocinetica preclinica.
  • Dosaggio farmaci antitumorali Pt-derivati.

Attrezzature

  • Attrezzatura standard per colture cellulari, biologia molecolare e colture batteriche
  • Strumento per PCR quantitativa a 4 colori
  • Citofluorimetro FACScan
  • Spettrofluorimetro accessoriato per analisi di flussi Ca++ in cellule
  • Spettrofotometro
  • Lettore ELISA multiscan
  • Gamma-counter
  • Elettroporatore standard e a onda quadra per elettroporazione in vivo
  • Microscopio ottico e a fluorescenza
  • Super e ultracentrifuga
  • Spettrometria di assorbimento atomico


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